国产精品免费一区二区三区四区,国产精品毛片久久久久久久,久久婷婷五夜综合色啪软件下

技術(shù)文章ARTICLE

您當(dāng)前的位置：首頁 > 技術(shù)文章 > 細(xì)胞培養(yǎng)遇到問題？怎么解決？

細(xì)胞培養(yǎng)遇到問題？怎么解決？

發(fā)布時(shí)間： 2022-01-15　　點(diǎn)擊次數(shù)： 1654次

培養(yǎng)細(xì)胞的過程中，時(shí)常會(huì)遇到各種的問題，怎么辦？以下是整理的一些常用問題的解決辦法。

培養(yǎng)液pH值變化太快
可能原因：
(1)CO2張力不對(duì)。
(2)培養(yǎng)瓶蓋擰得太緊。
(3)NaHCO3緩沖系統(tǒng)緩沖力不足。
(4)培養(yǎng)液中鹽濃度不正確。
(5)細(xì)菌、酵母或真菌污染。
建議解決方法：
(1)按培養(yǎng)液中NaHCO3濃度增加或減少培養(yǎng)箱內(nèi)CO2濃度，2.0g/L到3.7g/L濃度NaHCO3對(duì)應(yīng)CO2濃度為5%到10%。
(2)松開瓶蓋1/4圈。
(3)改用不依賴CO2培養(yǎng)液。加HEPES緩沖液至10到25mM終濃度。
(4)在CO2培養(yǎng)環(huán)境中改用基于Earle′s鹽配制的培養(yǎng)液，在大氣培養(yǎng)環(huán)境中培養(yǎng)改用Hanks鹽配制的培養(yǎng)液。
(5)丟棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌。
培養(yǎng)液出現(xiàn)沉淀，但pH值不變
可能原因：
(1)洗滌劑清洗后殘留有磷酸鹽，將培養(yǎng)基成分沉淀下來。
(2)冰凍保存培養(yǎng)液。
建議解決方法：
(1)用去離子水反復(fù)沖洗玻璃器皿，然后滅菌。
(2)將培養(yǎng)液加熱到37℃，搖動(dòng)使其溶解如沉淀仍然存在，丟棄培養(yǎng)液。
培養(yǎng)液出現(xiàn)沉淀，同時(shí)pH發(fā)生變化
可能原因：
(1)細(xì)菌或真菌污染。
建議解決方法：
(1)丟棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌。
培養(yǎng)細(xì)胞不貼壁

可能原因：
(1)胰蛋白酶消化過度。
(2)支原體污染。
(3)培養(yǎng)瓶瓶底不干凈。
(4)培養(yǎng)液pH值過堿(NaHCO3分解)。
(5)消化液或培養(yǎng)液配制錯(cuò)誤、過期儲(chǔ)存、儲(chǔ)存不當(dāng)。
(6)細(xì)胞老化(如傳代前細(xì)胞已匯合導(dǎo)致失去貼附性)。
(7)接種細(xì)胞起始濃度太低或太高。
建議解決方法：
(1)縮短胰蛋白酶消化時(shí)間或降低胰蛋白酶濃度。
(2)分離培養(yǎng)物，檢測(cè)支原體。清潔支架和培養(yǎng)箱。如發(fā)現(xiàn)支原體污染，丟棄培養(yǎng)物。
(3)注意刷洗，或換用一次性塑料培養(yǎng)瓶。
(4)使用無菌醋酸溶液調(diào)整pH值或充入無菌CO2(將培養(yǎng)液敞口放入培養(yǎng)箱也可)。
(5)重新配置消化液或培養(yǎng)液。
(6)啟用新的保種細(xì)胞。
(7)調(diào)節(jié)最佳接種細(xì)胞濃度。
懸浮細(xì)胞成簇
可能原因：
(1)培養(yǎng)液中含鈣、鎂離子。
(2)支原體污染。
(3)蛋白酶過度消化使得細(xì)胞裂解釋。
(4)DNA污染。
建議解決方法：
(1)用無鈣鎂平衡鹽氵容液洗滌細(xì)胞，輕輕吹吸細(xì)胞獲得單細(xì)胞懸液。
(2)分離培養(yǎng)物，檢測(cè)支原體。如發(fā)現(xiàn)支原體污染，丟棄培養(yǎng)物。
(3)用DNase I處理細(xì)胞。
原代細(xì)胞培養(yǎng)物污染
可能原因：
(1)原代培養(yǎng)組織在進(jìn)入培養(yǎng)前已污染。
建議解決方案：
(1)培養(yǎng)前用含高濃度抗生素的平衡鹽溶液反復(fù)沖洗組織。
培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)減慢
可能原因：
(1)由于更換不同培養(yǎng)液或血清。
(2)培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長(zhǎng)必需成分如谷氨酰胺或生長(zhǎng)因子耗盡或缺乏或已被破壞。
(3)培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染。
(4)試劑保存不當(dāng)。
(5)接種細(xì)胞起始濃度太低。
(6)細(xì)胞已老化。
(7)支原體污染。
建議解決方案：
(1)比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清支持細(xì)胞生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)。讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液。
(2)換入新鮮配制培養(yǎng)液，或補(bǔ)加谷氨酰胺及生長(zhǎng)因子。
(3)用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，丟棄培養(yǎng)物?；蛴每股爻?。
(4)血清需保存在-5℃到-20℃。培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存。含血清*培養(yǎng)液在2-8℃保存，并在2周內(nèi)用完。
(5)增加接種細(xì)胞起始濃度，換用新的保種細(xì)胞。
(7)分離培養(yǎng)物，檢測(cè)支原體。清潔支架和培養(yǎng)箱。如發(fā)現(xiàn)支原體污染，丟棄培養(yǎng)物。
培養(yǎng)細(xì)胞死亡
可能原因：
(1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2。
(2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大。
(3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷。
(4)培養(yǎng)液滲透壓不正確。
(5)培養(yǎng)液種有毒代謝產(chǎn)物堆積。
(6)更多原因參考問題4和問題7。
建議解決方案：
(1)檢測(cè)培養(yǎng)箱內(nèi)CO2。
(2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度。
(3)取新的保存細(xì)胞種。
(4)檢測(cè)培養(yǎng)液滲透壓。注意：大多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞能耐受滲透壓為260– 350 mOsm/kg。加入額外試劑如HEPES或藥物都有可能影響培養(yǎng)液滲透壓。
(5)換入新鮮培養(yǎng)液。

以上就是本期的內(nèi)容，更多資訊，歡迎點(diǎn)擊安培生物網(wǎng)站鏈接了解更多技術(shù)與產(chǎn)品資訊。

安培生物科技有限公司介紹：
安培生物堅(jiān)持為生命科學(xué)研究、活體動(dòng)物轉(zhuǎn)染、大規(guī)模生物生產(chǎn)、基因和細(xì)胞治療領(lǐng)域客戶，提供*細(xì)胞體內(nèi)可代謝的核酸轉(zhuǎn)染試劑；inviCELL™Platelet lysate無動(dòng)物血清產(chǎn)品旨在支持廣泛的細(xì)胞擴(kuò)增和生產(chǎn)，包括培養(yǎng)間充質(zhì)干細(xì)胞和多種免疫細(xì)胞系等，為制藥公司或者生物技術(shù)公司提供無血清細(xì)胞培養(yǎng)規(guī)模生產(chǎn)服務(wù)；提供以植物生物為平臺(tái)基因序列全人源化、*的細(xì)胞培養(yǎng)可分解3D基質(zhì)膠產(chǎn)品；提供內(nèi)毒素≦ 1.0 EU/mL、對(duì)細(xì)胞無毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產(chǎn)品。安培生物專注為生物醫(yī)藥領(lǐng)域提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)，努力發(fā)展為基因治療、細(xì)胞治療的生物科技企業(yè)。

下一篇：細(xì)胞凍存，讓細(xì)胞重活過來！

上一篇：認(rèn)識(shí)什么是單核細(xì)胞？

產(chǎn)品中心 Products

先锋影音亚洲中文字幕av,精品人妻伦一二三区久久,日韩a片无码毛片免费看小说,日产精品一线二线三线芒果

細(xì)胞培養(yǎng)遇到問題？怎么解決？

細(xì)胞培養(yǎng)遇到問題？怎么解決？